IB中文课程大纲
IB生物作为一门科学与实践类学科,对于学生实验能力的考察有着比较高的比重,考试中也会涉及实验操作和笔试。今天未来小编就和大家分析IB生物课程中比较经典的一个实验方法——免疫沉淀方法。 基本实验步骤 (1)收获细胞,加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30min,12,000g离心30 min后取上清; (2)取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜; (3)免疫沉淀反应后,在4°C以3,000 g速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底;将上清小心吸去,protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS加样缓冲液,沸水煮10分钟; (4)SDS-PAGE,Western blotting或进行质谱分析。 一、样品处理: 免疫沉淀实验成功与否,第一步处理样品非常关键。 免疫沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体之间的反应,而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中的抗原的质量,浓度以及抗原是否处于天然构象状态。 所以制备高质量的样品以用于后续的抗体-agarose beads孵育对免疫沉淀实验是否成功非常关键。在这个环节中,除了要控制所有操作尽量在冰上或者4°完成外,最为关键的是裂解液的成份。 用于免疫沉淀实验的样品一般是原代培养细胞裂解液或者细胞系裂解液。我们以常用的RIPA裂解液为例(主要含有pH7.4左右的离子缓冲液,接近生理浓度下的NaCl,一定比例的去垢剂和甘油以及各类蛋白酶抑制剂等)来说明其各主要成份的用途,进而帮助我们如何针对不同的实验目的和不同的蛋白质特性来选择最佳的裂解液。 a.缓冲液:离子缓冲液常采用pH7.4的Hepes或者Tris-Cl。 b.NaCl浓度一般习惯用150 mM,这主要是因为150 mM接近生理浓度,不会破坏蛋白质之间的相互作用。然而细胞内部的NaCl浓度并不是均一的,局部NaCl的浓度可以低到50 mM,150 mM的NaCl有可能会破坏这个区域的蛋白质相互作用。因此裂解液配方最佳的NaCl浓度要视所分析的蛋白的亚细胞定位而定。 c.甘油由于其粘性,可以对蛋白质之间的相互作用起到一个很好的保护作用。一般添加10%的甘油有助于稳定蛋白质之间的相互作用。 d.裂解液中的去垢剂可以裂解细胞质膜,也同时破坏了许多细胞器的膜,从而释放了其中储存的许多蛋白酶。 而由于用于免疫沉淀实验的去垢剂作用比较温和,因此蛋白酶的活性大部分得以保存。还有一部分蛋白酶来自胞质中,主要由于其抑制蛋白或者其活性抑制环境受到改变后从而恢复了蛋白酶活性。因此,添加蛋白酶抑制剂对于防止目的蛋白的降解从而完成免疫沉淀实验非常关键。一般主要通过添加EDTA抑制金属蛋白酶,通过Protease Cocktail(多种蛋白酶抑制剂混合物)可以抑制蛋白酶。 e.去垢剂对于免疫沉淀实验尤其是免疫共沉淀实验是一个非常关键的因素。不同的去垢剂种类和不同的去垢剂浓度主要通过影响以下三个因素来影响免疫沉淀效果: -细胞质/器膜的通透性:因为许多目的蛋白都定位在细胞器中,所以必须先将这些蛋白释放出来,抗体才能与之反应。 -膜蛋白的释放:许多膜蛋白的构象对去垢剂种类和浓度非常敏感,因此针对这类蛋白的免疫沉淀实验,需要谨慎地尝试多种去垢剂以及不同浓度。 -蛋白相互作用:不同去垢剂对不同性质的蛋白质的相互作用影响程度不一样,需要根据具体蛋白的特性进行分析选择去垢剂种类和浓度。而由于何种去垢剂适应作用于何种蛋白质现在很难精准预测,所以一个更为切实可行的办法就是通过具体实验筛选合适的去垢剂种类和浓度。 以上就是小编关于IB生物课程实验部分中的免疫沉淀法介绍,大家是不是已经都完全掌握了呢?更多IB生物学习指导问题,欢迎练习未来线上老师进行咨询和解答。


IB考试培训
New

IB OPENS
IB预习
IB
课程亮点
1
同步跟进国际课程,保证学生无缝衔接
2
顾问1V1全方位指导,制定专属学习计划
3
使用原版教材和九天独家辅导资料
4
实体教学环境,沉浸式高效学习

学科
经济类
经济学、会计、商务
自然科学类
物理、化学、生物、科学
人文社科类
地理、历史、心理学、社会学
数学及计算机类
数学、高等数学、计算机科学
语言类
中文、法语、西班牙语

课程适合人群
1
适用阶段

(1)欲就读于美国国际学校IB阶段的学生
(2)希望提前适应IB课程的学生

IB OPENS
2
学习收获

(1)课前顾问对学生学习能力1对1评估,量身打造课程,帮助学生充分完成课前预习
(2)课中导师双语沟通,对原版教材进行知识点精讲,帮助学生提前适应国外上课方式
(3)课后完成多样化作业并进行学术测试,班主任线上线下24小时答疑

IB OPENS
IB中文课程大纲
不同于其它国际课程,IB课程会开设以母语为基础的语言学科作为必修课,这有点类似于普通高中的语文课。今天未来小编就带大家一起来分析一下IB中文课程大纲,来看看IB中文都主要学些什么、如何考核以及和传统语文课相比有哪些不同吧! IB为什么开设中文学科? IB的六组学科里一共有两组语言课程,分别是母语(native language)和第二语言。这两组语言课程除了中文,还有英语、法语、西班牙语、日语、韩语等。IB开设两门语言课程的目的是要让学生学习国际意识(international mindedness),全球理解(global understanding)、跨文化理解(cross-cultural understanding)和批判性思维(critical thinking),同时培养学生的语言与文学鉴赏能力。学习母语是为了让学生了解自己国家的文化、历史和价值观,在语言和文学中获得愉悦并对它们产生终身的兴趣。 IB中文学习的主要内容是什么? IB中文分为高级课程(HL)和普通课程(SL),高级课程的教学时间为240课程,普通课程为150课时。国际文凭组织提供了一份文学作品学习清单供老师和学生选择。我们从清单中选择的文学作品包括《倾城之恋》(张爱玲)、《台北人》(白先勇)、《了不起的盖茨比》(菲茨杰拉德)、《三王》(阿城)、《目送》(龙应台)、《海子诗选》(海子)等,高级课程的学生需要学习这6部作品,普通课程需要学习其中的4部。 教学主题与内容包括:1.文化背景/语境中的语言,文本选自各种资料、体裁和媒体。2.语言与大众传播。3.文学——作品和背景/语境4.文学——批判性研究。 在学习材料上,IB中文主要使用哪些材料? 在语言材料中,有几部分的内容,第1部分是文化背景/语境中的语言。这一部分,我们会分析受众和目的如何影响材料的结构和内容,包括语言与权力、语言与群体、语言与性别以及语言与个体之间的相互关系和相互影响。 第2部分是语言与大众传播。学生要学习媒体如何使用语言、刻板印象、贴标签等方式制造偏见和操纵受众。这一部分学习的主题包括包括:劝说性语言的运用、文本偏见、刻板印象等。 第3部分是文学—作品和背景/语境。普通课程的学生要学习2部文学作品,高级课程的学生要学习3部文学作品。作品意义的形成受到其创作环境的文化因素和背景/语境因素的影响。也受到读者对其解读的影响。文学作品不是在真空中创作的,而是受到社会背景/语境、文化传统和历史变革的影响。通过仔细阅读文学作品,学生就能够对文学与大千世界中各种问题之间的关系加以考虑,例如性别、权力和身份认同等等问题。学生应有机会考虑作品是怎样建立在所继承和变化着的文学和文化传统之上的。学习翻译作品是一项硬性规定,旨在鼓励学生通过考察创作于其它语言和文化传统的作品,对他们自己的文化假设进行反思。 第4部分:文学—批判性研究。理解和诠释文学作品时,精读被认为是一种核心技能。通过仔细考察文学作品的细节,学生就会逐步认识到作品构思的复杂和微妙。 IB中文如何考核学生? IB中文考试主要分为三部分,IA(internal Assessment)占30%,WT(written task)占20%,5月份的全球统考占50%,全球统考又分Paper 1和Paper 2。 IB中文和中国的语文主要有哪些不同? 总体来说,IB中文更注重学生的独立思考,就是批判性思维,而不是知识本身的记忆。IB中文的学习过程中很多时候没有标准答案,学生需要通过自己的学习和研究寻找答案,并在给出答案的过程中阐述自己的思考和逻辑过程,通过论点和论据支撑自己的观点。 在授课的时候,老师被视为学生学习的支持者,而不仅仅是知识的传声筒,老师会采用以下方式促使学生和自己的教学达到国际文凭学习者培养目标:提供一种包容、积极和安全的课堂氛围。学生在探索和实践自己的回应以及质疑别人的见解时,应感到自信。增加学生的主人公意识。学生应获得各种各样进行批判和创造的机会,让他们通过多种多样生动活泼的学习方法,包括讨论、辩论、角色扮演、阅读、写作和口头表达,来展示他们对技能的理解。 中国学生学习IB中文通常遇到的挑战是什么? 中国学生最大的挑战是要改变他们学习的固化思维,就是不要老是想着寻找标准答案,IB中文的作业和考试很多时候没有标准答案。 以上就是小编关于IB中文课程大纲的分析,希望能够帮助大家更好的规划自己的中文课程学习。更多IB课程学习问题,欢迎随时咨询我们!
